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Facolta: Farmacia
Corso: Chimica e Tecnologia Farmaceutiche
Anteprima dell’appunto:
Il fattore di crescita per l’epidermide (EGF) un fattore di competenza che promuove il passaggio della cellula dalla fase G0 a quella G1; l’interazione dell’EGF con il suo recettore si traduce nella divisione cellulare. Gli eventi immediati che si riscontrano sono la dimerizzazione del recettore e la fosforilazione in tirosina del recettore stesso e di altre proteine substrato. I residui tirosinici fosforilati giocano un ruolo fondamentale nella trasduzione del segnale all’interno della cellula.
L’aumentata attivit della tirosina chinasi associata al recettore per l’EGF (EGFR) stata messa in relazione con varie malattie proliferative, in particolare con vari tipi di tumori e con la psoriasi. Un possibile approccio per la cura di queste malattie quello di interrompere il segnale proliferativo provocato dall’interazione fattore di crescita-recettore. L’inibizione dell’attivit tirosina chinasica impedisce l’attivazione della cascata del segnale proliferativo e non interferisce con segnali provenienti da altre cascate enzimatiche.
Lo scopo del nostro lavoro stato la progettazione, la sintesi e la caratterizzazione biologica di molecole capaci di inibire l’attivit tirosina chinasica associata all’EGFR.
La fase di progettazione stata curata principalmente da Antonello Romani, che si occupato sia della costruzione al computer del modello tridimensionale del dominio tirosina chinasico del recettore sia del disegno di nuovi inibitori. La sintesi delle molecole stata condotta da Pierluigi Zambelli presso il Dipartimento di Chimica Organica e Industriale.
La mia attenzione si rivolta principalmente sulla valutazione dell’attivit dei composti sul substrato biologico. In un primo momento abbiamo valutato la loro attivit su cellule in coltura. Gli inibitori noti sono risultati attivi (abbiamo ottenuto dati coerenti con quelli trovati in letteratura) mentre le nostre molecole sono risultate inefficaci. Un possibile motivo di questa inattivit potrebbe essere il mancato attraversamento della membrana cellulare da parte delle nostre molecole. Abbiamo perci deciso di testare le molecole su estratti cellulari in cui il recettore presente su piccoli frammenti lineari di membrana. Purtroppo anche in questo caso i risultati non sono stati quelli sperati. Alcuni composti sono risultati attivi a concentrazioni troppo elevate; queste molecole potranno essere prese a modello per la costruzione di inibitori attivi. Il metodo di indagine risultato semplice ed efficace e quindi potr essere utile per la valutazione di altri composti.
Contemporaneamente abbiamo cercato di isolare il recettore mediante cromatografia per affinit. Se il recettore cos isolato risulter attivo, i test di fosforilazione saranno condotti su di un sistema pi semplice e i risultati saranno pi accurati.
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